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SV40 PolyA(猴空泡病毒PolyA, 简称PolyA)序列是有转录终止作用和使转录的mRNA添加PolyA尾的DNA序列(240 bp), 含有AATAAA六核苷酸多腺苷化信号(Polyadenylation signal)。在pEGFP-C1质粒的GFP基因下游插入14个同向串联的Alu序列(Alu14), 构建pAlu14质粒, 瞬时转染HeLa细胞, 用Northern blot检测...
不同转染方式对GFP表达质粒在小鼠肝脏的表达影响
GFP表达质粒 流体力学注射 门静脉 基因疗法
2012/6/29
研究经流体力学注射、门静脉和腹腔常规注射3种不同途径注射GFP表达质粒后，目的基因在小鼠肝脏的表达情况及其转基因效率。方法 将裸质粒或脂质体包裹的质粒DNA分别应用流体力学注射、门静脉及腹腔常规注射法注入同种异体小鼠体内,48?h后分别取血和肝组织, 通过荧光显微镜观察3种转染途径对质粒DNA在小鼠肝脏的表达影响。结果 流体力学注射组及门静脉常规注射组均可见大量绿色荧光蛋白表达，两组的荧光表达...
Expression of Green Fluorescent Protein (GFP) using In Vitro translation cell free system
Green Fluorescent Protein (GFP) pIVEX In Vitro cell free expression system
2009/12/17
Background and the purpose of the study: One of the major concerns about recombinant protein production is its possible toxicity for the organism. Purification of the recombinant protein is another ch...
Staurosporine诱导人乳腺癌MCF7/GFP-Bax非受体依赖途径的细胞凋亡对Bax自胞浆至线粒体转移定位的影响
staurosporine 细胞凋亡 GFP-Bax 线粒体
2009/11/25
以建立的人乳腺癌MCF7 细胞GFP-Bax稳定表达细胞株(MCF7/GFP-PBax)，观察staurosporine(STS)诱导的非受体途径的细胞凋亡对Bax自胞浆转移定位于线粒体的影响。荧光显微镜观察凋亡细胞Bax从细胞浆至线粒体转移和细胞核染色体断裂，检测STS诱导细胞凋亡的量效和时效关系。免疫荧光法观察GFP-Bax从细胞浆转移至线粒体与定位、细胞色素c(cytochrome c，Cy...
hBDNF-GFP基因转染神经干细胞后hBDNF的表达及生物学特性研究。
目的：构建由绿色荧光蛋白（GFP）标记的人醛糖还原酶（AR）融合基因真核表达载体并在HEK293细胞中表达。 方法:应用DNA重组技术构建AR与GFP的融合基因（AR-GFP），将AR-GFP插入pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体中，通过磷酸钙共沉淀转染HEK293细胞，倒置荧光显微镜评价转染效率，Western blotting 技术检测AR基因在转染细胞中的整合及表达，分光光度法...
Hoechst33342、BrdU和GFP示踪恒河猴皮肤干细胞的实验研究
恒河猴 干细胞 实验方法
2009/6/9
目的： 通过采用Hoechst33342、5-溴-2-脱氧尿嘧啶（BrdU）和绿色荧光蛋白（GFP）3种不同的方法标记恒河猴皮肤干细胞，探索最有效、便利的干细胞示踪方法。方法： 体外培养纯化恒河猴皮肤干细胞后，分别用Hoechst33342、BrdU以及GFP基因转染3种方法标记皮肤干细胞。Hoechst33342和GFP标记皮肤干细胞直接通过荧光显微镜进行鉴定，BrdU标记后的细胞通过细胞免疫...